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黴菌酵母菌計數你懂得麽?Get起來吧!

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1真菌和酵母的引見

 

酵母是真菌中的一大類,平日是單細胞,呈圓形、卵圓形、香腸形或杆狀。

黴菌也是真菌的一種。普通把可以或許構成松散的絨毛狀菌絲體的小型真菌稱爲黴菌。

黴菌和酵母普遍散布于天然界並可作爲食物中正常菌相的一部門。歷久以來,人們應用某些黴菌和酵母加工一些食物,如用黴菌加工幹酪和肉,使其滋味鮮美;還可應用黴菌和酵母釀酒、制醬;食物、化學、醫藥等工業都少不了黴菌和酵母。

但在某些情形下,黴菌和酵母也可形成食物腐爛蛻變。因為它們發展遲緩和競爭才能不強,故經常在不適于細菌發展的食物中湧現,這些食物是pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食物、高溫儲藏的食物,含有抗菌素的食物等 。因為黴菌和酵母能抵禦冷凍,和抗生素和輻照等儲藏及收藏技術,它們能轉換某些晦氣于細菌的物資,而增進致病細菌的發展;有些黴菌可以或許分解有毒代謝産物-黴菌毒素。黴菌和酵母常常使食物外面落空色、噴鼻、味。例如,酵母在新穎的和加工的食物中滋生,可以使食物產生難聞的異味,它還可使液體產生混濁,發生氣泡,構成薄膜,轉變色彩及披發不正常的氣息等 

是以黴菌和酵母也作爲評價食物衛生質量的指導菌,並以黴菌和酵母計數來表現食物被真菌凈化的水平。今朝已有若幹個國度制定了某些食物的黴菌和酵母限量尺度。我國已制定了一些食物中黴菌和酵母的限量尺度。

 

2磨練辦法

 

黴菌和酵母的計數辦法,與菌落總數的測定辦法根本類似。重要步調爲:

將樣品制造成10倍梯度的濃縮液,選擇2~3個適合的濃縮度,分離汲取1mL于兩個無菌平皿,傾瀉造就基,造就後視察,計數。

對番茄醬、番茄汁實用于第二法 黴菌直接鏡檢計數法,是采取顯微鏡直接鏡檢計數的辦法。這個辦法表達的是該食物能否存在加工前的腐爛。

 

詳細磨練辦法尺度依照:

GB .152016《食物平安國度尺度 食物微生物學磨練 黴菌和酵母計數》 




1.樣品的處置:

爲了精確測定黴菌和酵母數,真實反應被檢食物的衛生質量,起首應留意

樣品的代表性。輕易混勻的液體樣品可用敏捷振搖樣品濃縮液容器25次來混勻。對大的固體食物樣品,要用滅菌刀或鑷子從分歧部位采用實驗資料,再停止均質。如樣品不太大,最好把全體樣品放到拍擊式均質器內均質1min。因為黴菌絲狀構造的特征,應用扭轉刀均質器能夠會招致較高的不真實計數成果。

2.樣品的濃縮:

限量值較嚴厲的樣品,可以直接取原液停止磨練。爲了削減濃縮倍數的誤差,在持續遞增濃縮時,每濃縮度應改換一根吸管。之前尺度劃定在濃縮過程當中,爲了使黴菌的胞子充足散開,需用滅菌吸管重復吹吸50次。如今試驗室前提較好,爲了避免發生無害的氣溶膠而且削減操作凈化,普通建議應用漩渦混雜儀來充足混勻濃縮液。

3.造就基的選擇:

在黴菌和酵母計數中,重要應用以下幾種選擇性造就基。

土豆葡萄糖瓊脂造就基(PDA):

黴菌和酵母在PDA造就基上發展優越。用PDA作平板計數時,必需參加抗菌素(國標應用的是氯黴素)以克制細菌。然則這個造就基上黴菌輕易舒展發展,影響最初的計數。

孟加拉紅(虎紅)造就基:

該造就基中的孟加拉紅可克制黴菌菌落的舒展發展。孟加拉紅還在菌落後頭由孟加拉紅發生的更深的白色有助于黴菌和酵母菌落的計數。也須要參加抗菌素(國標應用的是氯黴素)克制細菌的攪擾。

高鹽察氏造就基:

食糧和食物中罕見的曲黴和青黴在該造就基上分別後果優越,它具有克制細菌和減緩發展速度快的毛黴科菌種的感化。如今僅限于飼料黴菌磨練辦法尺度采取。

4.傾瀉造就:

每壹個樣品應選擇3個合適的濃縮度,每壹個濃縮度分離取21mL參加2個平皿。同時汲取1mL無菌濃縮液參加一個無菌平皿作爲空白對比。造就基熔化後冷卻至46 ℃,立刻傾瀉並扭轉使濃縮液與瓊脂混勻,先向一個偏向扭轉,再轉向相反偏向,充足混雜平均。造就基凝結後,把平皿正置于溫箱造就。大多半黴菌和酵母在中等溫度的前提下發展優越,是以,美國FDA劃定的造就溫度是25℃,我國劃定的造就溫度是28℃。造就3d後開端視察菌落發展情形,共造就5d。視察第5天的計數成果,並記載。如空白對比有菌落湧現。此次實驗有效。

5.菌落計數及申報:

拔取菌落數10150之間的平板停止計數。一個濃縮度應用兩個平板,取兩個平板菌落數的均勻值,乘以濃縮倍數申報。固體檢樣以g爲單元申報,液體檢樣以mL單元申報。關于濃縮倍數的選擇可參考細菌菌落總數測定。

6.黴菌直接鏡檢計數法:

采取該辦法,須要一片較爲昂貴的霍華德黴菌計測片。沒有這個玻璃片,沒法停止這個直接鏡檢的辦法。

該辦法將果醬或果汁濃縮到必定波美度後,塗布在霍華德黴菌計測片上。然後在顯微鏡下視察,視察50個視野外面能否有黴菌。請求兩小我停止此試驗。以100個視野視察成果申報。



PDA上的青黴

黴菌菌絲的特點:

平行壁:黴菌菌絲呈管狀,多半情形下,全部菌絲的直徑是分歧的。是以在顯微鏡下菌絲壁看起來象兩條平行的線。這是差別黴菌菌絲和其他纖維時最有效的特點之一。

橫隔:很多黴菌的菌絲具有橫隔,唯壹毛黴、根黴等多數黴菌的菌絲沒有橫隔。

菌絲內呈粒狀:薄壁、呈管狀的菌絲含有原生質,在高倍顯微鏡下透細致胞壁可見其呈粒狀或點狀。

分枝:如菌絲不太短,則多半呈分枝狀,分枝與骨幹的直徑簡直雷同,有分枝是判定黴菌菌絲的靠得住特點之一。

菌絲的頂端:常呈鈍圓形,無折射景象。

凡是有以上特點之一的絲狀都可剖斷爲黴菌菌絲。

視察視野中有沒有菌絲,凡相符以下情形之一者爲陽性視野。   

一根菌絲長度加上分枝的長度跨越視野直徑1/6

一根菌絲長度跨越視野直徑1/6;   

兩根菌絲總長度跨越視野直徑1/6;  

三根菌絲總長度跨越視野直徑1/6;  

一叢菌絲可視爲一個菌絲,壹切菌絲(包含分枝)總長度跨越視野直徑1/6

依據對壹切視野的視察成果,盤算陽性視野所占比例,並以陽性視野百分數(%)申報成果。

盤算公式:

每件樣品陽性視野(%)=(陽性視野數 / 視察視野數)×100

 

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